ORF1ab y la prueba rápida SARS-COV-2 RT-QPCR de la polimerización en cadena de los genes de N prueban fluorescencia triple

Análisis de SARS-COV-2 RT-qPCR (método triple de la fluorescencia RT-PCR), detección de genes de ORF1ab y de N del SARS CoV 2

El análisis del qPCR de SARS-COV-2 RT es (rt) una prueba reversa en tiempo real de la reacción en cadena de polimerasa del transcriptase (RT) (polimerización en cadena) prevista para la detección cualitativa de genes de ORF1ab y de N del SARS CoV 2 en la esponja nasofaríngea (NP), la esponja (DE OP. SYS.) orofaríngea y el espécimen del esputo recogidos por un trabajador de la atención sanitaria, de los pacientes sospechosos de COVID-19 por su proveedor de asistencia sanitaria.

Características

• Alta exactitud
• Límite de detección: 200 copies/mL
• Sensibilidad: el 100%
• Especificidad: 99,1%
• Exactitud: 99,3%

Operación conveniente

las Triple-detecciones en una solas cartilla y punta de prueba del tubo (los genes de ORF1ab y de N, gen humano de la ARNasa P (RNP)) premezclaron la forma líquida

Confiable

• Sistema anticontaminación: UDG
• Control interno: Gen humano de RNaseP (RNP)
• Control positivo: Pseudovirus

Rápido

Resultado sobre cerca de 1 hora

INSTRUMENTOS APLICABLES:

Instrumento en tiempo real de la polimerización en cadena con los canales de FAM, de TEJAS RED/ROX y de HEX/VIC, tales como ABI7500, ABI Q3, ABI Q6, bio Rad CFX96.

Pulmonía nueva del coronavirus (coronavirusdisease2019, covid-19). la infección sars-cov-2 es un problema de salud pública global serio que ha causado pérdidas económicas severas por todo el mundo, llevando la Organización Mundial de la Salud (WHO) para caracterizar el brote sars-cov-2 como emergencia de la salud pública de la preocupación internacional.

La investigación temprana de casos sospechosos y del aislamiento y el tratamiento de los pacientes infectados con sars-cov-2 son dominantes a controlar el brote, pues no hay droga o vacuna específica disponible tratar pulmonía del neocrown. Actualmente, el patrón oro para la diagnosis de la infección sars-cov-2 es la reacción en cadena de la reversetranscription-polimerasa (rt-polimerización en cadena). Desde el lanzamiento del genoma completo de sars-cov-2, los laboratorios de la salud pública, los laboratorios clínicos y las compañías de diagnóstico de los países diferentes han desarrollado una variedad de métodos rt-polimerización en cadena para la detección sars-cov-2, apuntando diversos genes y regiones genomic del genoma viral (orf1ab, rdrp, n, e, etc.).

Sin embargo, el método rt-polimerización en cadena ha revelado muchas desventajas y defectos en la práctica, especialmente durante emergencias de la salud pública tales como el brote actual sars-cov-2. los métodos rt-polimerización en cadena son incómodos realizarse y necesitar ser realizado en los instrumentos de la polimerización en cadena por los técnicos de laboratorio profesionales entrenados.

Esto hace difícil cubrir la demanda para la prueba in situ, y para las áreas remotas o los hospitales primarios con los recursos limitados, las muestras se deben transportar a un hospital de alto nivel con las instalaciones de prueba rt-polimerización en cadena para probar. Esto es no sólo largo pero también aumenta el riesgo de exposición del virus. Además, la rt-polimerización en cadena para la prueba sars-cov-2 durante el pandémico covid-19 produjo una alta tarifa del falso negativo (30-50%) por varias razones, que sigue habiendo un problema no-insignificante.

La reacción catalítica del uno mismo-montaje de la DNA de la horquilla (catalytichairpinassembly, cha) es un sistema ácido nucléico enzima-libre isotérmico de la amplificación de la señal. Dos sistemas de puntas de prueba de una sola fila complementarias de la DNA con una estructura de la horquilla se diseñan basados en el fragmento del ARN de la blanco que es detectado. Cuando el fragmento de la blanco no está presente, ambos sistemas de DNA de una sola fila están presentes en una estructura de la horquilla.

Cuando el fragmento del ARN de la blanco está presente en el sistema, los dos sistemas de puntas de prueba de una sola fila de la DNA con la estructura de la horquilla abrirán la estructura de la horquilla a su vez y formarán un filamento doble de la DNA bajo efecto catalítico del ARN de la blanco. El proceso catalítico entero no consume el fragmento del ARN de la blanco, y el fragmento del ARN de la blanco impulsa los dos sistemas de puntas de prueba de una sola fila de la DNA para formar un filamento doble antes de continuar a la siguiente ronda de la reacción, así creando la amplificación de la señal. Finalmente, la detección del fragmento del ARN de la blanco es alcanzada detectando la punta de prueba doble-trenzada de la DNA.